产品货号：
YT467
中文名称：
C端mCherry标签融合蛋白质粒
英文名称：
pCMV-C-mCherry
产品规格：
1μg|100μg
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体，一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-736 |
| mCherry | 741-1451 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1501-1522 |
| SV40 polyAsignal | 1534-1917 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2055-2361 |
| bla promoter | 2386-2510 |
| SV40 promoter | 2530-2868 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2903-3694 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3695-4153 |
| pUC origin | 4282-4949 |
| 组分 | 1μg | 100μg |
| pCMV-C-mCherry质粒 | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
1.pCMV-C-mCherry中没有的酶切位点包括：
| AclI | AfeI | AflII | AgeI | AscI | AsiSI | BaeI |
| BcgI | BlpI | BmgBI | BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI |
| BssHII | BstZ17I | EarI | EcoNI | FseI | NruI | PmeI |
| PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SapI | ScaI | SpeI |
| SwaI | XmnI |
2.pCMV-C-mCherry中的单酶切位点包括：
| NdeI | CA`TA,TG | 240 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 1177 | |
| SnaBI | TAC|GTA | 346 | Bpu10I | CC`TNA,GC | 1282 | |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 380 | BbvCI | CC`TCA,GC | 1282 | |
| NheI | G`CTAG,C | 597 | BsgI | GTGCAG(N)14,NN` | 1333 | |
| BmtI | G,CTAG`C | 597 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 1422 | |
| SacI | G,AGCT`C | 651 | XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 1426 | |
| Eco53kI | GAG|CTC | 653 | BsrGI | T`GTAC,A | 1441 | |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 659 | PspOMI | G`GGCC,C | 1452 | |
| SacII | CC,GC`GG | 660 | ApaI | G,GGCC`C | 1452 | |
| NotI | GC`GGCC,GC | 668 | PvuI | CG,AT`CG | 1532 | |
| TspMI | C`CCGG,G | 680 | BclI | T`GATC,A | 1688 | |
| XmaI | C`CCGG,G | 680 | MfeI | C`AATT,G | 1781 | |
| SmaI | CCC|GGG | 682 | HpaI | GTT|AAC | 1794 | |
| BamHI | G`GATC,C | 687 | BtsI | GCAGTG,NN` | 1868 | |
| HindIII | A`AGCT,T | 693 | MluI | A`CGCG,T | 1917 | |
| EcoRI | G`AATT,C | 705 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2144 | |
| EcoRV | GAT|ATC | 713 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2803 | |
| SalI | G`TCGA,C | 717 | ClaI | AT`CG,AT | 2871 | |
| AccI | GT`MK,AC | 718 | BspDI | AT`CG,AT | 2871 | |
| BglII | A`GATC,T | 723 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3149 | |
| XhoI | C`TCGA,G | 729 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3149 | |
| PaeR7I | C`TCGA,G | 729 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3262 | |
| XbaI | T`CTAG,A | 735 | RsrII | CG`GWC,CG | 3547 | |
| AhdI | GACNN,N`NNGTC | 934 | BstBI | TT`CG,AA | 3713 | |
| SbfI | CC,TGCA`GG | 1092 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4020 | |
| BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 1176 | PciI | A`CATG,T | 4949 |
pCMV-C-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T3 primer (620-639):5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-mCherry primer (852-873):5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′
pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考下图。
图3．pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
- 本质粒未经百奥莱博书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 首次使用1μg包装的本制品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本制品质粒浓度为0.1μg/μl，共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-C-mCherry质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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